Tehoseulontatulosten validointi rintasyöpäsoluissa
Vikström, Jan (2012)
Vikström, Jan
Turun ammattikorkeakoulu
2012
All rights reserved
Julkaisun pysyvä osoite on
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-201201161349
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-201201161349
Tiivistelmä
Rintasyöpä on naisten yleisin syöpätyyppi. Pääkasvain saadaan usein poistettua kokonaan, mutta etäpesäkkeet vaikeuttavat syövän hoitamista levitessään kehossa. Rintasyövässä tyypillisiä etäpesäkkeiden paikkoja ovat keuhkot, luusto, maksa sekä aivot.
Tämän opinnäytetyön tarkoituksena oli validoida RNA-interferenssi –tehoseulonnan tulokset mahdollisten rintasyövän etäpesäkkeiden muodostamiseen vaikuttavien kohdegeenien tunnistamiseksi.
Etäpesäkkeiden muodostumisessa on tärkeässä asemassa epiteliomesenkymaalinen muuntuminen (EMT), jossa epiteelisolut muuntuvat mesenkymaalisten solujen kaltaisiksi. Tämä mahdollistaa syöpäsolujen liikkumisen ja etäpesäkkeiden muodostumisen kauas pääkasvaimesta. Epiteliomesenkymaalisen muuntumisen paljon käytettyinä merkkeinä ovat E-kadheriinin ekspressiotason lasku ja vimentiinin ekspressiotason nousu. Lisäksi on tunnistettu transkriptiotekijöitä, jotka edistävät epiteliomesenkymaalista muuntumista.
Tehoseulonta, jonka kohteena oli vimentiiniin vaikuttavat geenit, oli tehty aiemmin mesenkymaalisessa erittäin metastaattisessa MDA-MB-231(SA)-solulinjassa. Tulosten validoimiseksi kohdegeenejä hiljennettiin RNA-interferenssin avulla MDA-MB-231(SA)-soluissa. Näiden hiljennysten vaikutus E-kadheriinin, vimentiinin, sekä transkriptiotekijöiden Snail, Slug, ZEB1, ZEB2, sekä Foxc2 mRNA-tasoon tutkittiin qRT-PCR:n avulla.
Tutkimus antaa tietoa rintasyövän etäpesäkkeiden muodostumisen säätelystä. Tulokset osoittivat, että kohdegeenit säätelevät vimentiinin mRNA-ekspressiota, sekä vaikuttavat tunnettujen epiteliomesenkymaalisen muuntumisen merkkeihin. Opinnäytetyö oli osa laajempaa tutkimusta ja saatujen tulosten kliinisen käytettävyyden arviointiin tarvitaan lisätutkimuksia.
Tämän opinnäytetyön tarkoituksena oli validoida RNA-interferenssi –tehoseulonnan tulokset mahdollisten rintasyövän etäpesäkkeiden muodostamiseen vaikuttavien kohdegeenien tunnistamiseksi.
Etäpesäkkeiden muodostumisessa on tärkeässä asemassa epiteliomesenkymaalinen muuntuminen (EMT), jossa epiteelisolut muuntuvat mesenkymaalisten solujen kaltaisiksi. Tämä mahdollistaa syöpäsolujen liikkumisen ja etäpesäkkeiden muodostumisen kauas pääkasvaimesta. Epiteliomesenkymaalisen muuntumisen paljon käytettyinä merkkeinä ovat E-kadheriinin ekspressiotason lasku ja vimentiinin ekspressiotason nousu. Lisäksi on tunnistettu transkriptiotekijöitä, jotka edistävät epiteliomesenkymaalista muuntumista.
Tehoseulonta, jonka kohteena oli vimentiiniin vaikuttavat geenit, oli tehty aiemmin mesenkymaalisessa erittäin metastaattisessa MDA-MB-231(SA)-solulinjassa. Tulosten validoimiseksi kohdegeenejä hiljennettiin RNA-interferenssin avulla MDA-MB-231(SA)-soluissa. Näiden hiljennysten vaikutus E-kadheriinin, vimentiinin, sekä transkriptiotekijöiden Snail, Slug, ZEB1, ZEB2, sekä Foxc2 mRNA-tasoon tutkittiin qRT-PCR:n avulla.
Tutkimus antaa tietoa rintasyövän etäpesäkkeiden muodostumisen säätelystä. Tulokset osoittivat, että kohdegeenit säätelevät vimentiinin mRNA-ekspressiota, sekä vaikuttavat tunnettujen epiteliomesenkymaalisen muuntumisen merkkeihin. Opinnäytetyö oli osa laajempaa tutkimusta ja saatujen tulosten kliinisen käytettävyyden arviointiin tarvitaan lisätutkimuksia.