Solukalvoon sitoutuvien hiilihappoanhydraasien ilmentyminen punasoluissa
Sutinen, Sini (2018)
Sutinen, Sini
2018
Lääketieteen lisensiaatin tutkinto-ohjelma - Licentiate's Degree Programme in Medicine
Lääketieteen ja biotieteiden tiedekunta - Faculty of Medicine and Life Sciences
This publication is copyrighted. You may download, display and print it for Your own personal use. Commercial use is prohibited.
Hyväksymispäivämäärä
2018-02-02
Julkaisun pysyvä osoite on
https://urn.fi/URN:NBN:fi:uta-201802061182
https://urn.fi/URN:NBN:fi:uta-201802061182
Tiivistelmä
Punasolujen hiilihappoanhydraasien tärkein fysiologinen tehtävä on taata hiilidioksidin tehokas kuljetus perifeerisistä kudoksista keuhkoihin. Solulimassa sijaitsevat hiilihappoanhydraasi-isomuodot katalysoivat tehokkaalle kuljetukselle välttämätöntä hiilidioksidin hydraatioreaktiota bikarbonaatiksi. Myös useita solukalvoon sitoutuvia isomuotoja esiintyy elimistössä, mutta punasoluissa niiden ilmentymistä ei ole juurikaan tutkittu.
Tämän tutkimuksen tarkoituksena oli selvittää ilmentävätkö punasolut solukalvoon sitoutuvia hiilihappoanhyraaseja (CA IV, CA IX, CA XII ja CA XIV). Aihe on merkityksellinen hengitykseen liittyvän fysiologian kannalta, sillä nykytiedon mukaan hiilidioksidin hydraatiota tapahtuu entsyymin katalysoimana ainoastaan solun sisällä. Pääasiallisena tutkimusmenetelmänä käytettiin perifeerisen veren sivelynäytteiden epäsuoraa immunofluoresenssivärjäystä.
Sivelynäytteissä nähtiin positiivista värjäytymistä puna- ja valkosoluissa kaikille tutkittaville isoentsyymeille paitsi CA IX:lle. Western blot, RNA-sekvensointi tai massaspektrometria ei kuitenkaan tue löydöksiä punasoluissa, ja tulokset jäivät siten epävarmoiksi. Vahvimmin positiivisia löydökset olivat CA IV:n kohdalla, ja pieni mahdollisuus jää, että punasolujen solukalvolla voisi olla vähäinen määrä CA IV-aktiivisuutta. Tulosten varmentaminen CA IV:n osalta ja solukalvoon sitoutuvien CA-isomuotojen ilmentyminen valkosoluissa edellyttävät jatkotutkimuksia.
Tämän tutkimuksen tarkoituksena oli selvittää ilmentävätkö punasolut solukalvoon sitoutuvia hiilihappoanhyraaseja (CA IV, CA IX, CA XII ja CA XIV). Aihe on merkityksellinen hengitykseen liittyvän fysiologian kannalta, sillä nykytiedon mukaan hiilidioksidin hydraatiota tapahtuu entsyymin katalysoimana ainoastaan solun sisällä. Pääasiallisena tutkimusmenetelmänä käytettiin perifeerisen veren sivelynäytteiden epäsuoraa immunofluoresenssivärjäystä.
Sivelynäytteissä nähtiin positiivista värjäytymistä puna- ja valkosoluissa kaikille tutkittaville isoentsyymeille paitsi CA IX:lle. Western blot, RNA-sekvensointi tai massaspektrometria ei kuitenkaan tue löydöksiä punasoluissa, ja tulokset jäivät siten epävarmoiksi. Vahvimmin positiivisia löydökset olivat CA IV:n kohdalla, ja pieni mahdollisuus jää, että punasolujen solukalvolla voisi olla vähäinen määrä CA IV-aktiivisuutta. Tulosten varmentaminen CA IV:n osalta ja solukalvoon sitoutuvien CA-isomuotojen ilmentyminen valkosoluissa edellyttävät jatkotutkimuksia.