Happiradikaali-ja antioksidanttipuolustusmittausten optimointi lohikalojen verelle ja silmäloisille
Tammi, Johanna (2014)
Tammi, Johanna
Turun ammattikorkeakoulu
2014
All rights reserved
Julkaisun pysyvä osoite on
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2014092314151
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2014092314151
Tiivistelmä
Opinnäytetyön ensimmäisenä tavoitteena oli validoida mittausmenetelmä reaktiivisten happiradikaalien mittaamiseksi lohikalojen verestä. Validoinnin kohteina olivat: veren ja DCFH-DA:n konsentraatiot, standardi, standardin konsentraatio, standardipisteet, sisäinen standardi, inkubaatiolämpötila ja mittauksen toistettavuus. Näistä validoinnin kohteista tehtiin useita erilaisia kuvaajia, joiden tulkinnan perusteella valittiin parhaimmat vaihtoehdot varsinaiseen ROS-mittaukseen.
Toisessa vaiheessa käytettiin jo aikaisemmin validoituja antioksidanttipuolustuksen mittausmenetelmiä joihin oli tarkoituksena soveltaa uutta näytematriisia eli silmäloisia. Näytematriisin pieni koko aiheutti haasteita, koska sitä ei ollut mahdollista homogenisoida suurempaan näytemäärään, sillä muuten näytteen proteiinipitoisuudet olisivat laskeneet liikaa.
Toisessa vaiheessa käytettiin jo aikaisemmin validoituja antioksidanttipuolustuksen mittausmenetelmiä joihin oli tarkoituksena soveltaa uutta näytematriisia eli silmäloisia. Näytematriisin pieni koko aiheutti haasteita, koska sitä ei ollut mahdollista homogenisoida suurempaan näytemäärään, sillä muuten näytteen proteiinipitoisuudet olisivat laskeneet liikaa.