Kuusentaimien mykorritsasienten tunnistaminen kolonnisaatiokokeissa
Uutela, Tatu (2013)
Uutela, Tatu
Jyväskylän ammattikorkeakoulu
2013
All rights reserved
Julkaisun pysyvä osoite on
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2013052911613
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2013052911613
Tiivistelmä
Opinnäytetyö tehtiin Metsäntutkimuslaitokselle. Opinnäytetyössä tunnistettiin kuusen juurista mykorritsoja eli symbioottisia juuristosieniä. Opinnäytetyö on osa tutkimusta, jossa selvitetään kuusen kasvun parantamista mykorritsoilla. Tutkimus pyrkii kehittämään teolliseen mittakaavaan soveltuvan tavan mykorritsojen kasvattamiseksi ja siirrostamiseksi.
Opinnäytetyössä aineistona olivat koe-erän taimet, joihin siirrostettiin uudella kehitetyllä teollisella sovellutuksella juuristosieniä. Tarkoitus oli selvittää, oliko mykorritsojen siirrostus onnistunut. Tämä selvitettiin etsimällä juurista sieniä mikroskoopilla. Mikroskopointitulokset varmistettiin DNA-menetelmillä, joihin kuului DNA:n eristys fenoli-kloroformi uutolla, DNA:n monistus polymeraasiketjureaktiolla, monistuksen tarkistus agaroosigeelielektroforeesilla (AGE) ja sienilajien tunnistus denaturoivalla gradientti geelielektroforeesilla (DGGE).
Siirrostus ei ollut onnistunut halutulla tavalla, sillä vain muutama sienilaji oli muodostanut mykorritsan. Näistä lajeista Cadophora Finlandia oli lupaavin. Se oli kolonisoinut juurenkärjistä noin 20 %. Yleinen taimitarhamykorritsa Thelephora Terrestris oli kontaminoinut kaikki näytteet. Se oli kolonisoitunut selvästi vahvemmin juuristoon kattaen 30 – 80 % juurenkärjistä. Tämä johtuu taimitarhassa vallitsevista kasvuolosuhteista. Tämä kuului tutkimukseen, koska teollisen tavan oli kyettävä mykorritsoimaan juuria näissä oloissa. Cadophora Finlandia:n odotetaan lisäävän taimien kasvua istutuksen jälkeen.
Opinnäytetyössä aineistona olivat koe-erän taimet, joihin siirrostettiin uudella kehitetyllä teollisella sovellutuksella juuristosieniä. Tarkoitus oli selvittää, oliko mykorritsojen siirrostus onnistunut. Tämä selvitettiin etsimällä juurista sieniä mikroskoopilla. Mikroskopointitulokset varmistettiin DNA-menetelmillä, joihin kuului DNA:n eristys fenoli-kloroformi uutolla, DNA:n monistus polymeraasiketjureaktiolla, monistuksen tarkistus agaroosigeelielektroforeesilla (AGE) ja sienilajien tunnistus denaturoivalla gradientti geelielektroforeesilla (DGGE).
Siirrostus ei ollut onnistunut halutulla tavalla, sillä vain muutama sienilaji oli muodostanut mykorritsan. Näistä lajeista Cadophora Finlandia oli lupaavin. Se oli kolonisoinut juurenkärjistä noin 20 %. Yleinen taimitarhamykorritsa Thelephora Terrestris oli kontaminoinut kaikki näytteet. Se oli kolonisoitunut selvästi vahvemmin juuristoon kattaen 30 – 80 % juurenkärjistä. Tämä johtuu taimitarhassa vallitsevista kasvuolosuhteista. Tämä kuului tutkimukseen, koska teollisen tavan oli kyettävä mykorritsoimaan juuria näissä oloissa. Cadophora Finlandia:n odotetaan lisäävän taimien kasvua istutuksen jälkeen.