Fuusioproteiini Fc-endostatiinin tuottaminen nisäkässolussa
Huhta, Tarja (2012)
Huhta, Tarja
Oulun seudun ammattikorkeakoulu
2012
All rights reserved
Julkaisun pysyvä osoite on
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-201205168545
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-201205168545
Tiivistelmä
Lääkkeinä käytettäviä arvokkaita valkuaisaineita on puhdistettu aiemmin luonnollisista lähteistä. Geenitekniikan avulla niitä voidaan nykyään tuottaa rekombinanttiproteiineina solutehtaissa eli tuottosoluissa, joihin on siirretty halutunlaisen valkuaisaineen valmistumista ohjaava geenirakenne. Rekombinanttiproteiini voi sisältää luonnollisen valkuaisaineen rakenteiden ohella lisärakenteita, erilaisia puhdistushäntiä tai myös jonkin toisen proteiinin rakenneosia. Nämä tehostavat lääkeproteiinin talteenottoa tai parantavat sen stabiilisuutta tai vaikutusajan kestoa elimistössä.
Opinnäytetyössä tavoitteena oli tuottaa verisuonten muodostumista vähentävää endostatiinia rekombinanttimuodossa, jossa IgG-vasta-ainemolekyylin Fc-osaan oli saumattomasti liitetty endostatiini. Fc-endostatiini-fuusiovasta-ainetta tuotettiin kaupallisessa nisäkässolulinjassa, hamsterin soluissa (CHO, Chinese Hamster Ovary). Endostatiinia voidaan käyttää muun muassa syövän hoidossa estämään kasvainta ruokkivan verisuoniston muodostumista.
Opinnäytetyö tehtiin Oulun Yliopistossa, Biolääketieteen laitoksen Fysiologian yksikössä. Työ oli osa laajempaa Euroopan aluekehitysrahaston rahoittamaa toimintaympäristön kehittämishanketta, Biopalvelut kilpailukykyisiksi tuotteiksi, jossa kehitettiin uudenlaisia molekyylityökaluja sekä tuotantomenetelmiä erilaisten vasta-aineiden tuottoon.
Työssä siirrettiin onnistuneesti rekombinanttivasta-ainekonstrukti nisäkässoluihin, joiden tuottamaa vieraan geenin ohjeen mukaista valkuaisainetta pystyttiin havaitsemaan tuottomediumissa ELISA-määrityksillä, polyklonaalisten endostatiini- tai anti-human-vasta-aineen avulla.
Opinnäytetyössä tavoitteena oli tuottaa verisuonten muodostumista vähentävää endostatiinia rekombinanttimuodossa, jossa IgG-vasta-ainemolekyylin Fc-osaan oli saumattomasti liitetty endostatiini. Fc-endostatiini-fuusiovasta-ainetta tuotettiin kaupallisessa nisäkässolulinjassa, hamsterin soluissa (CHO, Chinese Hamster Ovary). Endostatiinia voidaan käyttää muun muassa syövän hoidossa estämään kasvainta ruokkivan verisuoniston muodostumista.
Opinnäytetyö tehtiin Oulun Yliopistossa, Biolääketieteen laitoksen Fysiologian yksikössä. Työ oli osa laajempaa Euroopan aluekehitysrahaston rahoittamaa toimintaympäristön kehittämishanketta, Biopalvelut kilpailukykyisiksi tuotteiksi, jossa kehitettiin uudenlaisia molekyylityökaluja sekä tuotantomenetelmiä erilaisten vasta-aineiden tuottoon.
Työssä siirrettiin onnistuneesti rekombinanttivasta-ainekonstrukti nisäkässoluihin, joiden tuottamaa vieraan geenin ohjeen mukaista valkuaisainetta pystyttiin havaitsemaan tuottomediumissa ELISA-määrityksillä, polyklonaalisten endostatiini- tai anti-human-vasta-aineen avulla.