Production of recombinant proteins and monoclonal antibodies - Techno-enonomical evaluation of the production methods

No Thumbnail Available
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Kemian ja materiaalitieteiden tiedekunta | Licentiate thesis
Date
2009
Department
Major/Subject
Tehdassuunnittelu
Mcode
Kem-107
Degree programme
Language
en
Pages
117
Series
Abstract
Terapeuttisia tai diagnostiikassa käytettäviä rekombinanttiproteiineja ja vasta-aineita voidaan tuottaa useissa eri tuotto-organismeissa (mikrobi-, hyönteis- tai eläinsoluissa), erilaisissa bioreaktoreissa (sekoitusreaktorissa, onttokuitureaktorissa tai kertakäyttöisissä pussireaktoreissa) sekä käyttäen erilaisia tuotantomenetelmiä (panos, puolipanos tai jatkuvatoiminen kasvatus). Tuotantokustannukset (euroa/g) riippuvat tuotto-organismin ominaisuuksista kuten kasvunopeudesta ja tuottavuudesta sekä tuottomenetelmästä kuten kasvatusvaiheen solutiheydestä sekä kokonaissaannosta. Kriittisimpiä tekijöitä ovat bioreaktorivaiheen tuotto sekä kokonaissaanto. Tässä työssä analysoitiin rekombinanttiproteiinin ja monoklonaalisen vasta-aineen pienen mittakaavan tuotannon taloudellisuutta. HIV-1 Nef-proteiinia tuotettiin erilaisissa tuottoorganismeissa (E. coli, P. pastoris and Drosophila S2) ja vasta-ainetta erilaisissa bioreaktoreissa. E. coli -bakteerin todettiin olevan edullisin tuotto-organismi HIV-1 Nef-proteiinin tuotannossa. Vastaaineen tuotannossa, onttokuitureaktorin tuotantokustannukset olivat hieman matalemmat kuin sekoitusreaktorin. Työssä esitellään myös kiteytysmenetelmä rekombinantti HIV-1 Nef-proteiinille.

Recombinant proteins and antibodies for therapeutic or diagnostic use can be produced in many host organisms (microbial, insect and mammalian cells), in different bioreactors (stirred-tank bioreactor, hollow fiber bioreactor and disposable bag bioreactors) and using various feeding strategies (batch, fed-batch or perfusion). The manufacturing cost (euros /g) of the product depends on the characteristics of the production host (growth rate, productivity) and on the production method (cell density in the bioreactor phase and the overall yield). Most critical variables are the fermentation titer (g/l) and the total yield (%). The manufacturing costs of production of recombinant proteins and monoclonal antibodies were analyzed for two applications. In the recombinant protein application the focus was on the effect of production host (E. coli, P. pastoris and Drosophila S2) and in the monoclonal antibody application in different bioreactor setups. The E. coli was found to be the lowest cost system in HIV-1 Nefprotein production. In Mab production, the hollow fiber bioreactor was found to have slightly lower manufacturing costs than the perfusion stirred-tank bioreactor. Also a crystallization method for recombinant HIV-1 Nef protein was developed.
Description
Supervisor
Hurme, Markku
Keywords
biopharmaceutical production, economic
Other note
Citation